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ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT/Jurkat

CBP74003

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I. Background

      抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC,antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity )是指抗体的 Fab 段结合病毒感染的细胞或肿瘤细胞的抗原表位,其 Fc 段与杀 伤细胞(NK 细胞、巨噬细胞等)表面的 FcR 结合,介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞,它是 抗肿瘤的治疗性抗体药物发生作用的一种作用重要机制。

      传统用于测定 ADCC/ADCP 的方法主要依赖于相关原代免疫细胞的分离、体外分化, 进而测量靶细胞的杀伤或吞噬效应。这些方法高度依赖供体原代细胞,价格昂贵且费时费 力,对原代细胞的分离分化过程对实验操作的要求非常高,实验失败风险较大,由于分离 分化细胞纯度问题,还存在检测信号低以及不稳定均一的问题。另外,原代细胞具有不可 再生性,每次实验的细胞供体来源可能都不一致,实验结果可重复性较差,可能存在批次 差异。由于以上这些因素的影响,在需要高质量控制的药物开发过程中,很难建立稳定可 靠的检测方法。

 
II. Description

      ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat 报告基因药靶模 型很好的模拟了体内 ADCC 的信号转导过程,原理见下图所示。



Figure 1. 
ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat 细胞模型原理图

 
III. Introduction
Host Cell: Jurkat
Expressed gene: NFAT-Luc-CD16(V158)
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Synonym(s): Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+300μg/ml hygromycin+1μg/ml puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Immediately upon receipt, store in liquid nitrogen.
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Peripheral blood
Disease: Acute T cell leukemia
Morphology: Lymphoblast
Growth Properties: Suspension
 
Ⅴ. Representative Data

Figure 2. Recombinant ADCC Bioassay Effector Cell V variant (High Affinity)-Fcγ-NFAT/Jurkat stably expressing CD16aV158).

Figure 3. Dose response of CD20 Ab in ADCC Bioassay Effector Cell (High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat cell(C36). Dose response of TNFα Abs in ADCC Bioassay Effector Cell V variant(High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat cell(C36)with Membrane Anchored TNFα Cells(Suspended,C5).



Figure 4. Dose response of TNFα Abs in ADCC Bioassay Effector Cell V variant(High Affinity)-Fcγ-NFAT Jurkat cell(C36)with Membrane Anchored TNFα Cell (Adherent,C12).

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