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TSHR CHO

CBP71474

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I. Background

      G 蛋白偶联受体(GPCR)是跨膜蛋白受体,其特征是配体数量可变,包括内源性神 经递质和激素,也包括外源性天然和人工化合物。激动剂与受体结合后会触发信号通路的 激活;而拮抗剂则会阻碍激动剂介导的受体激活。反向激动剂除像拮抗剂一样干扰激动剂 外,还会抑制受体的组成活性。

      糖蛋白激素,包括促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、绒毛膜促性腺激素 (CG)和促甲状腺激素(TSH),是脊椎动物许多生殖和代谢功能所必需的关键内分泌激 素。促甲状腺激素受体(TSHR)是一种细胞表面糖蛋白受体,属于 G 蛋白偶联受体 (GPCR),与促甲状腺激素(TSH)结合,启动 G 蛋白偶联信号级联,形成环磷酸腺苷, 刺激甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)的产生。

      通过循环 TSH 或自身抗体结合到甲状腺细胞表面来激活 TSHR 和相关的信号级联,在 控制甲状腺细胞生长和调节甲状腺激素的产生/分泌中起关键作用。这是通过开启 G 蛋白的 不同亚型和信号通路来执行的。其中,Gs 和 Gq 诱导的级联反应最为重要,因为它们与 TSHR 下游响应刺激的特定细胞内信号转导密切相关。

 
II. Description

       cAMP 在 G 蛋白偶联受体(GPCR)信号转导中是一种关键的第二信使。当配体结合 到 GPCR,构象发生变化,激活受体接着激活 G 蛋白,Gs 的激活导致腺苷酸环化酶调控 cAMP 的升高。TSHR 药靶模型很好的模拟了体内 TSHR 的信号转导过程,原理见下图所示。

 

Figure 1. TSHR CHO 细胞模型原理图
 
III. Introduction
Expressed gene: TSHR
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS+5μg/ml Puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional assay for TSHR
Transducer: Gs
 
IV. Representative Data

Figure 2. Recombinant TSHR CHO stably expressing TSHR.

Figure 3.  HTRF cAMP Assay with TSHR CHO(C11).


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