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GRE-Luc A549

CBPM0011

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I. Background
      糖皮质激素(GC) 是类固醇激素,它们在炎症、生长、代谢和发育中的多种作用, 对许多生理功能具有重要影响。由于其抗增殖和抗炎特性,GCs 几十年来一直被用于治疗 恶性肿瘤以及各种炎症和自身免疫性疾病。临床上常用的合成 GC 包括地塞米松(Dex)、 倍他米松、可的松、氢化可的松、甲泼尼龙和泼尼松龙。

      由肾上腺皮质产生的内源性 GC 受到 HPA(下丘脑-垂体-肾上腺)轴的严格调控,它 们的亲脂性使它们能够轻松地通过细胞膜扩散。在细胞内,GCs 通过糖皮质激素受体(GR) 介导其作用,糖皮质激素受体是属于核激素受体超家族的转录因子。在不存在 GC 的情况 下,GR 与分子伴侣蛋白形成复合物被隔离在细胞质中;当它存在于细胞质中时,分子伴 侣蛋白保持其非活性状态并组织受体的结构构象以接受配体。配体结合后,GR 变得活跃 并在细胞质和细胞核之间动态穿梭,作为转录因子发挥作用,正向和负向调节许多依赖于 GR 的基因。

      GR 的转录诱导主要由 GR 同源二聚体与包含糖皮质激素反应元件(GREs) 的启动子 区域结合触发,这种机制称为 GR 依赖性反式激活(TA)。另一方面,GR 依赖的反式抑 制(TR)是由 GR 与 DNA 结合的转录因子如 NF-κB 和激活蛋白-1 (AP-1)相互作用介导 的,导致各自的抑制炎症信号级联。一些患有糖皮质激素抵抗型哮喘、类风湿性关节炎、 溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮、急性淋巴细胞白血病或慢性淋巴细胞白血病的患者的 GR 水平升高。
 
II. Description
     GRE-Luc A549 报告基因细胞,是由 GRE 调控并表达 Luc 荧光素酶报告 基 因的 A549 细 胞。 Dexamethasone (Hexadecadrol, 地 塞米 松)是 糖皮质激素受体 (Glucocorticoid Receptor)激动剂、凋亡诱导剂,原理见下图所示。



Figure 1. GRE-Luc A549 细胞原理示意图
 
II. Introduction
Host Cell: A549
Expressed gene: GR-GAL4 Luciferase 
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS+300 μg/ml hygromycin
Storage: Liquid nitrogen
 
III. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Lung
Disease: Carcinoma
Morphology: Epithelial cells, growing adherently as monolayer
Growth Properties: Adherent
 
IV. Representative Data

Figure 2. Dose Response of Dexamethasone in GRE-Luc A549(C34).

 

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