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ARE-Luc/MCF7

CBPB0016

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I. Background
      Nrf2 是一种转录因子,可调节与炎症、氧化应激和细胞能量代谢相关的各种基因的表达。在正常情况下,Nrf2 通过与细胞骨架蛋白 Kelch 样 ECH 相关蛋白 1 (Keap1) 结合而保留在细胞溶胶中。Nrf2 在氧化应激时, Keap1 半胱氨酸残基的修饰会促进抑制复合物的解离和 Nrf2 的核易位,Nrf2 与其伴侣 sMAF 形成异二聚体并与 ARE 结合,从而驱动一系列Nrf2 靶基因的表达,例如 NAD(P)H 醌氧化还原酶 1(NQO1)、血红素加氧酶 1(HO-1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶(GCL)、谷胱甘肽 S-转移酶(GSTs)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和硫氧还蛋白 UDP-葡萄糖醛酸转移酶。Nrf2功能障碍可能导致神经系统疾病,如阿尔茨海默病、帕金森病和亨廷顿病以及肌萎缩侧索硬化症 (AMS)。
 
II. Background
     ARE-Luc MCF7 报告基因细胞是由 ARE 调控并表达 Luc 荧光素酶报告 基因的 MCF7 细胞。Sulforaphane 是 Keap1/Nrf2/ARE 的诱导剂,Bardoxolone 是 NRf2 的激 活剂,原理见下图所示。


Figure 1. ARE-Luc MCF7 原理示意图
 
III. Introduction
Host Cell: ARE-Luc
Expressed gene: MCF7
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: MEM+10% FBS+ 1% Non Essential Amino Acids (NEAA) + 1mM Sodium Pyruvate (NaP)+150 μg/ml hygromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Mammary gland, breast; derived from metastatic site: pleural effusion
Disease: Breast adenocarcinoma
Morphology: Epithelial-like cells growing as monolayers
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Induction of ARE activity by Sulforaphane in ARE-Luc MCF7(C59).



Figure 3. Induction of ARE activity by Bardoxolone in ARE-Luc MCF7(C59).
 

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