STR鉴定技术灵敏度堪忧？普遍还是个例？

三家公司均未检测出10%的污染样本，有两家检测出20%污染样本和30%污染样本，但是分析未报出全部差异位点，一家三个污染样本均未检出。通过分析结果发现，除了与CE的灵敏度相关外，与实验人员对结果的判读也有很大关系。

Fig 2. 不同污染占比浓度的STR样本在三家公司Penta E基因座的STR检测结果图，其他20个基因座有类似的情况，文中不一一罗列。

1. 现状与挑战

传统STR技术的局限性：STR（短串联重复序列）作为法医DNA鉴定的“金标准”，在检测混合样本及微量DNA样本时，其灵敏度受到限制。尤其对于死者样本中含有少量嫌疑人DNA的情况，毛细血管电泳技术可能无法有效检出。

受到MSI（微卫星不稳定性）检测的启示：MSI伴随诊断试剂盒，检测限可达30%。虽然MSI主要针对单核苷酸和二核苷酸重复序列，技术难度较高，但也提示我们，四核苷酸重复序列的STR可能具备更高的灵敏度开发潜力。

新兴技术的可能性：NGS（下一代测序）和dPCR（数字PCR）技术作为更为精准和灵敏的分子检测工具，已在临床、科研等领域展现出巨大的应用前景。将这些技术应用于STR检测中，或许可以突破现有STR检测的灵敏度瓶颈。

2. NGS与dPCR在STR检测中的优势

NGS技术：

• 高灵敏度与多位点检测：NGS可实现对多个STR位点的深度测序，提高检测灵敏度，尤其适用于复杂混合样本的分析。

• SNP与STR结合：已有公司推出基于SNP的NGS方法，这为STR检测提供了新的思路。将NGS技术与STR检测相结合，可提高样本分辨率与灵敏度。

• 溯源与个体识别：NGS可以实现对微量DNA样本的高通量检测，区分相近细胞系，同时还可以检测细微的污染，同时针对鼠源以及人源，不需要做二次实验。

DdPCR技术：

• 超高灵敏度：dPCR通过将DNA样本进行绝对定量分割，可实现对极微量DNA的精准定量，检测灵敏度远超传统PCR技术。

• 绝对定量与低丰度检测：dPCR在低丰度DNA检测方面优势显著，特别适用于微量DNA或高混合度样本的分析。

• STR位点检测的潜力：将dPCR技术应用于STR检测，可进一步提升微量DNA的检出能力，弥补传统PCR的不足。

3.倡议与发展方向：

面对快速变化的科学需求和技术挑战，STR技术的进一步升级迫在眉睫。为推动STR技术创新与优化，满足更高精度、更广泛应用的需求，我们特此发出倡议：

• 研发更高灵敏度的NGS-STR方法：结合NGS的高通量与精准性，开发针对STR位点的高灵敏度测序方法，用于混合样本鉴定。

• 探索dPCR在STR检测中的应用：优化数字PCR技术，使其能够精准检测微量、低丰度的STR位点，尤其是复杂背景下的样本。

• 多技术融合：整合NGS、dPCR与SNP分析，形成灵敏度更高、分辨率更强的法医物证鉴定体系。

•  其他方法学。